Методы определения глюкозы в крови
Sansara58.ru

Медицинский портал

Методы определения глюкозы в крови

Как сдавать анализы на уровень глюкозы и о чем могут сказать результаты исследований?

Уровень сахара в крови имеет большое значение при диагностике различных заболеваний и в первую очередь – сахарного диабета. Оценить данный показатель помогут лабораторные анализы на глюкозу. Поговорим о них подробнее.

Глюкоза в результатах анализа

Большую часть необходимой нам энергии мы получаем за счет углеводов. В желудочно-кишечном тракте последние расщепляются на простые молекулы-моносахариды – глюкозу, фруктозу и галактозу, причем на долю глюкозы приходится до 80% абсорбированных моносахаридов. В ряде случаев наш организм способен превращать в глюкозу также жиры и белки. Таким образом, глюкоза является основным источником энергии. Стоит отметить, что существенные изменение нормального уровня содержания глюкозы считается весьма тревожным симптомом.

Определить уровень сахара в крови можно только с помощью анализа на глюкозу, но есть некоторые признаки, которые говорят о том, что с этим показателем не все в порядке. Обычно врач дает направление на анализ крови на глюкозу, если у пациента наблюдаются такие симптомы, как:

  • повышенная утомляемость;
  • головные боли;
  • снижение веса при повышенном аппетите;
  • сухость во рту, постоянная жажда;
  • частое и обильное мочеиспускание, особенно ночью;
  • появление фурункулов, долгое заживление язв, ранок и царапин;
  • снижение иммунитета;
  • зуд в паху при отсутствии инфекций;
  • снижение остроты зрения, особенно у лиц старше 50 лет.

Существуют также группы риска. Людям, входящим в них, нужно регулярно сдавать анализ на глюкозу. Это относится к лицам, страдающим диабетом, а также тем, в чьей семье были случаи этого заболевания, людям с избыточным весом и артериальной гипертензией.

Высокий уровень глюкозы в крови может быть связан не с заболеванием, а с приемом некоторых препаратов – например, оральных контрацептивов, мочегонных средств, амфетаминов, стероидных противовоспалительных лекарств.

Типы анализов на уровень глюкозы в крови

Для современной медицины определить уровень глюкозы в крови – не проблема. Разработано много точных методов для выявления этого показателя.

Лабораторные методы

Чаще всего используются лабораторные методы определения уровня глюкозы в крови – они наиболее достоверны.

Биохимический анализ крови на уровень глюкозы

Это самый распространенный, базовый метод определения уровня глюкозы в крови. Он используется в медицине уже несколько десятков лет, так как обладает высокой информативностью и достоверностью. Анализ сдается натощак, для обследования берут 5 мл крови из вены. Результаты выдают очень быстро – на следующий день или даже через несколько часов. Стоимость такого анализа – 300–600 рублей.

Чтобы получить более точную картину, врач иногда назначает дополнительные уточняющие тесты.

Анализ крови на толерантность к глюкозе с «нагрузкой» (глюкозотолерантный тест натощак с нагрузкой)

Этот анализ назначается при подозрении на наличие скрытых нарушений углеводного обмена. Он представляет собой исследование изменений уровня глюкозы в крови после приема насыщенного раствора сахара. Анализ состоит из трех этапов – сначала кровь берут натощак, как в случае обычного биохимического анализа, затем дают пациенту выпить сахарный раствор и следом дважды с часовым интервалом делают повторные заборы проб крови. Между исследованиями пациент не должен есть, пить или курить. Стоимость анализа – 700–850 рублей.

Глюкозотолерантный тест на С-пептиды

Определение С-пептида дает количественную оценку функции бета-клеток, продуцирующих инсулин, дифференцирует инсулинозависимый и инсулиннезависимый сахарный диабет. Средняя стоимость проведения этого теста в лабораториях Москвы – 1500–1700 рублей.

Анализ на гликированный гемоглобин

Гликированный гемоглобин – это форма гемоглобина, которая образуется в результате его взаимодействия с глюкозой. Данный показатель отражает уровень глюкозы крови на протяжении периода жизни эритроцитов, то есть до 120 суток. Этот тест обычно используется для оценки степени компенсации сахарного диабета и позволяет провести раннюю диагностику некоторых форм данного заболевания. Стоимость – 600–800 рублей.

Анализ на уровень фруктозамина

Фруктозамин – это вещество, образующееся в результате взаимодействия белков плазмы с глюкозой. Его количество показывает степень компенсации сахарного диабета на фоне лечения. Кровь сдают утром натощак. Этот анализ отражает средний уровень глюкозы в плазме за 2–3 недели до измерения. Цена теста – 400–600 рублей.

Анализ на уровень лактата

Лактат – это известная всем молочная кислота, которая образуется в процессе расщепления глюкозы в тканях. Именно лактат является причиной мышечных болей после интенсивных тренировок. В норме молочная кислота поступает в кровь и утилизируется. Причиной повышения уровня лактата служит тканевая гипоксия, то есть кислородное голодание клеток. Примерно у половины больных сахарным диабетом лактат повышен. Кровь на лактат сдают утром натощак. Проверить уровень молочной кислоты можно за 800–1100 рублей.

Анализ на уровень глюкозы в крови беременных (глюкозотолерантный тест при беременности)

В сущности, это обычный тест на уровень глюкозы c нагрузкой, разница лишь в понятии нормы – как мы уже говорили, при беременности уровень сахара в крови может повышаться, а примерно 14% будущих мам сталкиваются с разновидностью диабета, получившего название «гестационный». Стоимость теста – 700–850 рублей.

Анализ мочи на уровень глюкозы

Для определения уровня сахара берут не только кровь, но и мочу. В норме у здорового человека глюкоза в моче отсутствует. Ее наличие говорит о развитии сахарного диабета или о его плохой компенсации. Стоимость теста – 280–350 рублей.

Экспресс-методы

Существуют также различные методы для определения уровня сахара в домашних условиях – например, специальные приборы – глюкометры, тест-полоски для определения уровня глюкозы в крови и моче. Они предназначены для самостоятельного контроля уровня сахара – больной может контролировать этот показатель и вести специальный дневник, который поможет доктору в выборе терапии или ее коррекции. Но заменить лабораторные анализы такие тесты не могут – их точность все же далека от идеала.

Анализ крови на глюкозу: как подготовиться и как сдавать?

Чтобы тест дал точный результат, к нему необходимо подготовиться. Некоторые медикаменты, изменения в привычной диете и режиме дня могут значительно повлиять на результаты исследования.

Обычно анализ крови на сахар сдают утром, натощак – между последним приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8–12 часов, а для глюкозотолерантного теста – не менее 12 часов. В течение 3-х дней перед проведением анализа нужно придерживаться своей обычной диеты, не ограничивая себя специально в углеводах, пить побольше воды и отказаться от тяжелых физических нагрузок, алкоголя и приема некоторых лекарств, которые могут исказить результаты – салицилатов, оральных контрацептивов, тиазидов, кортикостероидов, фенотиазина, лития, метапирона, витамина С. Разумеется, перед тем как отказаться от медикаментов, нужно проконсультироваться с лечащим врачом. Перед проведением тестов не рекомендуется курить и пить что-либо, кроме обычной воды. Кроме того, сдавать кровь на сахар нужно в спокойном состоянии, поэтому врачи рекомендуют приходить в поликлинику немного раньше, чтобы минут 15 посидеть в коридоре и успокоиться.

Определение уровня сахара экспресс-методом желательно проводить до еды.

Расшифровка анализов на уровень глюкозы

Норма глюкозы у детей до 14 лет составляет 3,33–5,55 ммоль/л, у взрослых норма глюкозы в крови – 3,89–5,83 ммоль/л, с 60 лет уровень глюкозы в норме возрастает до 6,38 ммоль/л. При беременности нормальным считается уровень 3,3–6,6 ммоль/л. Следует отметить, что беременность может спровоцировать развитие сахарного диабета, поэтому женщине, вынашивающей ребенка, необходимо своевременно сдавать анализ на глюкозу.

О чем могут говорить отклонения?

В норме содержание глюкозы несколько повышается после еды, но стабильно высокий уровень сахара может говорить о наличии таких заболеваний, как сахарный диабет, эндокринные нарушения, панкреатит. Низкий же уровень глюкозы характерен для заболеваний поджелудочной железы, гипотиреоза, цирроза, опухолей желудка и отравлений некоторыми токсичными веществами – например, мышьяком.

Если анализ показал, что уровень сахара повышен, следует немедленно обратиться к врачу. Однако паниковать не стоит – изменение уровня глюкозы может возникать при многих состояниях, причем даже у здоровых людей. К примеру, иногда сахар повышается во время стрессового периода или любой ситуации, когда происходит выброс адреналина – согласитесь, таких моментов в жизни современного человека хватает.

Имейте в виду, что интерпретировать результаты анализа на глюкозу и поставить диагноз может только врач, который учтет не только результаты теста, но и другие показатели и симптомы.

Читать еще:  Что снижает сахар в крови народными средствами

Глюкоза

Наиболее распространенный углевод в животном организме — глюкоза. Она играет роль связующего звена между энергетическими и пластическими функциями углеводов, поскольку из глюкозы могут образовываться все другие моносахариды, и наоборот — различные моносахариды могут превращаться в глюкозу.

Более 90% всех растворимых низкомолекулярных углеводов крови приходится на глюкозу; кроме того, в небольших количествах могут присутствовать фруктоза, мальтоза, манноза и пентозы, а при патологии и галактоза. Наряду с ними в крови содержатся связанные с белками полисахариды.

Особенно интенсивно глюкозу потребляют и используют для разнообразных нужд ткани центральной нервной системы, эритроциты, мозговое вещество почек. В промежуточном обмене глюкоза используется для образования гликогена, глицерина и жирных кислот, аминокислот, глюкуроновой кислоты и гликопротеинов. Концентрация глюкозы в крови является производной процессов гликолиза и окисления трикарбоновых кислот в ЦТК, гликогенеза и гликогенолиза в печени и мышечной ткани, глюконеогенеза в печени и почках, поступления глюкозы из кишечника.

В клинической практике обычно исследуют содержание глюкозы в крови, к определению концентрации других сахаров и гликогена прибегают значительно реже. В крови человека глюкоза довольно равномерно распределена между плазмой и форменными элементами, установлено, что в венозной крови содержание сахара на 0,25‑1,0 ммоль/л (в среднем на 10%) меньше, чем в артериальной и капиллярной. Известную диагностическую ценность представляет определение молочной и пировиноградной кислот, активности ряда ферментов углеводного обмена, сиаловых и гексуроновых кислот, серомукоидов, гликозилированного гемоглобина и других показателей.

Содержание глюкозы в моче зависит от ее концентрации в крови, хотя выделяется она как при нормальном, так и при повышенном уровне сахара крови. При повышении концентрации глюкозы в крови преодолевается так называемый почечный порог (у здоровых людей лежит в области 8,3‑9,9 ммоль/л) и наступает глюкозурия. При артериосклеротической почке, при диабете порог повышается и может не отмечаться глюкозурия даже при повышении концентрации глюкозы до 11,0‑12,1 ммоль/л.

Методы определения глюкозы в крови подразделяют на три группы: редуктометрические, колориметрические и энзиматические.

1. Редуктометрические методы:

  • титрометрический способ Хагедорна‑Йенсена основан на свойстве сахара восстанавливать при кипячении в щелочной среде железистосинеродистую и железосинеродистую соли калия. По степени этого восстановления титрометрически исследуют концентрацию сахара в крови. Важным преимуществом метода является дешевизна и возможность использования в любой лаборатории;
  • основанные на восстановлении нитробензолов, например, пикриновой кислоты в пикраминовую;
  • метод, основанный на способности глюкозы восстанавливать соли меди. Образующаяся одновалентная медь выступает в качестве промежуточного вещества. Окисляясь кислородом воздуха, она восстанавливает мышьяковомолибденовую или фосфорновольфрамовую кислоту, которые служат окончательным хромогеном.

Однако следует иметь в виду, что методы этой группы дают завышенные результаты (примерно на 20‑25%), так как в крови присутствует ряд соединений, не относящихся к углеводам, но обладающих восстановительными свойствами (мочевая кислота, глутатион, креатинин, аскорбиновая кислота);

2. Колориметрические методы. К ним относятся:

  • метод Сомоджи — реакция восстановления меди, находящейся в составе меднотартронового реактива, до закиси меди. Метод трудоемок, многостадиен, неспецифичен и в настоящее время практически не используется;
  • метод Фолина‑Ву — реакция восстановления тартрата меди в закись. Метод прост, недостатком является отсутствие строгой пропорциональности между интенсивностью получаемой окраски и концентрацией глюкозы;
  • определение концентрации глюкозы по Моррису и Роэ — дегидратация глюкозы под действием серной кислоты и превращение ее в оксиметилфурфурол, который конденсируется с артроном в соединение синего цвета. Требует чистейших реактивов и четкого соблюдения постояной температуры реакции;
  • ортотолуидиновый метод Гультмана в модификации Хиваринена-Никкила, состоящий в определении интенсивности окрашивания раствора, возникающего при взаимодействии ароматического амина ортотолуидина с альдегидной группой глюкозы в кислой среде. Этот способ точен и дает возможность более специфичного определения содержания глюкозы.
  • анилиновый метод, сохраняет чувствительность ортотолуидинового метода, но еще более специфичен.

3. Ферментативные методы:

  • основанный на гексокиназной реакции. Глюкоза под действием гексокиназы фосфорилируется за счет АТФ, образовавшийся Гл‑6‑Ф в присутствии дегидрогеназы восстанавливает НАДФ. Количество последнего определяют по увеличению светопоглощения в ультрафиолетовой области. Метод слишком дорогостоящий для практических лабораторий.
  • основанные на окислении глюкозы до глюкуроновой кислоты с помощью фермента глюкозооксидазы и образовании в ходе реакции перекиси водорода, которая (в разных модификациях):
Концентрация глюкозы, ммоль/л
Цельная кровь Плазма
венозная капиллярная венозная капиллярная
Норма
Натощак 3,3–5,5 3,3–5,5 4,0–6,1 4,0–6,1
Через 2 часа после ПГТТ 6,7 7,8 7,8 8,9 6,1 >6,1 >7,0 >7,0
Через 2 часа после ПГТТ >10,0 >11,1 >11,1 >12,2

На уровень глюкозы в биологическом образце значительное влияние оказывает его хранение. При хранении образцов при комнатной температуре в результате гликолиза происходит существенное снижение содержания глюкозы. Для ингибирования процессов гликолиза и стабилизации уровня глюкозы в пробу крови добавляют фторид натрия (NaF). При взятии образца крови, согласно докладу экспертов ВОЗ (2006 г.), если немедленное отделение плазмы невозможно, образец цельной крови должен быть помещен в пробирку, содержащую ингибитор гликолиза, которую следует хранить во льду до выделения плазмы или проведения анализа.

Показания к исследованию

  • Диагностика и мониторинг СД;
  • заболевания эндокринной системы (патология щитовидной железы, надпочечников, гипофиза);
  • заболевания печени;
  • ожирение;
  • беременность.

Особенности взятия и хранения образца. Перед исследованием необходимо исключить повышенные психо-эмоциональные и физические нагрузки.

Предпочтительно – плазма венозной крови. Образец следует отделить от форменных элементов не позднее, чем через 30 мин после взятия крови, избегать гемолиза.

Образцы стабильны не более 24 ч при 2–8 °C.

Метод исследования. В настоящее время в лабораторной практике наибольшее распространение получили ферментативные методы определения концентрации глюкозы – гексокиназный и глюкозооксидазный.

  • СД 1 или 2 типа;
  • диабет беременных;
  • заболевания эндокринной системы (акромегалия, феохромоцитома, синдром Кушинга, тиреотоксикоз, глюкоганома);
  • гемахроматоз;
  • панкреатит острый и хронический;
  • кардиогенный шок;
  • хронические заболевания печени и почек;
  • физические упражнения, сильное эмоциональное напряжение, стресс.
  • Передозировка инсулина или гипогликемических препаратов у больных СД;
  • заболевания поджелудочной железы (гиперплазия, опухоли), вызывающие нарушение синтеза инсулина;
  • дефицит гормонов, обладающих контринсулярным действием;
  • гликогенозы;
  • онкологические заболевания;
  • тяжелая печеночная недостаточность, поражения печени, вызванные отравлением;
  • заболевания ЖКТ, нарушающие всасывание углеводов.
  • алкоголизм;
  • интенсивная физическая нагрузка, лихорадочные состояния.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 – 2020

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро “Шоссе Энтузиастов”, “Перово”
+7 (495) 788-000-1, [email protected]

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Методы определения глюкозы в крови

Основным показателем углеводного обмена является глюкоза. Измерение сахара в крови помогает в определении различных заболеваний, в частности таких как сахарный диабет и всевозможные болезни крови. Чтобы предотвратить многие недуги врачи рекомендуют держать уровень глюкозы в пределах нормы.

Методы

Есть несколько методов, которые могут быстро измерить уровень сахара в крови. Наиболее популярными считаются:

  • Ферментативный;
  • Гексокиназный метод.

Раньше использовались также редуктометрический и колорометрический, но из-за токсичности и низкой точности они больше не используются в современной медицине.

Ферментивный метод определения глюкозы в крови условно делится на:

Глюкозооксидазный метод

Определение глюкозы в крови глюкозооксидазным методом используется еще с начала века.
Он популярен тем, что использует ферменты для получения результата. То есть, основывается на реакции окисления глюкозы в крови или моче. А также по результатам с использованием плазмы крови. Простота метода заключается также в том, что результат очень быстро можно получить при помощи биохимического фотометра, так и автоматическим анализатором.
Такой метод специалисты считают наиболее точным, а для анализа необходима кровь или сыворотка крови.
У него также есть некоторые недостатки: во время анализа, перекись водорода, которая образуется от синтеза, может значительно занижать результаты глюкозы.

Поэтому такой метод считают линейным, с ошибкой в 30ммоль/л.

Гексокиназный метод

Такой метод считают референтным по измерению уровня глюкозы в крови, но наиболее точным, так как не взаимодействует с компонентами сыворотки крови. Чаще всего этот метод используют в эндокринологических отделениях.
Сотрудники лаборатории могут предложить способы проведения такого анализа:

  • провести обследование при помощи автоматического биохимического анализатора;
  • автоматический фотометр, который используют в небольших лабораториях;
  • в экстренных ситуациях удобным будет карманный глюкометр (One Touch).

Достаточно быстро можно определить уровень глюкозы в крови каждого человека.

Каким анализом определить глюкозу?

Проводить анализ крови можно в лаборатории или в домашних условиях. Почти все методы лабораторных анализов предполагают забор крови из вены или пальца. И хоть данный анализ не требует специальной подготовки. Есть факторы, которые могут повлиять на результаты:

Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).Задать вопрос>>

  • Сильная физическая нагрузка накануне сдачи анализа.
  • Сильное эмоциональное потрясение.
  • Переедание или чрезмерное употребление алкогольных напитков.
  • Также стоит помнить о том, что не следует перед анализом крови 2-3 дня использовать лекарственные препараты.

Если кровь для анализа берут из вены, делать это нужно утром, натощак.

Если же для анализа используют кровь из пальца, ее забор можно совершать в любое время суток.
На качество лабораторного исследования могут влиять такие факторы:

  • время забора крови;
  • материал пробирок или качество системы для забора крови;
  • положение тела пациента;
  • квалификация медицинских сотрудников.

Хранение и транспортировка образца очень важна для правильного результата. Для этого используют специальные системы вакуумного хранения, которые надежно защищают образец от внешних факторов.

Такие контейнеры защищают от солнца и света, образцы крови в них могут храниться до 2 суток.

Портативные измерители

Фотометрические глюкометры, как анализатор глюкозы, может использовать для анализа только капиллярную кровь. Это значит, что анализ можно делать в домашних условиях, используя кровь из пальца или пятки.

Посмотрите видео на эту тему

Наиболее популярные фотометрические глюкометры

Данные приборы показывают результат, который снован на изменении окраса крови, что является реакцией глюкозы и нанесенных на тест-полоску веществ.

Электрохимические глюкометры

Глюкометры данного вида самые удобные и качественные. Электрохимический глюкометр показывает уровень сахара по электрическому току, который появляется в результате взаимодействия крови с глюкозой.

Спектрометрические глюкометры

Данные устройства не предполагают контакта аппарата с кровью.

Спектрометрические глюкометры сканируют ладонь человека лазером и считывают особые биохимические процессы.

Другие измерители:

  1. лазерный глюкометр,
  2. сенсорный,
  3. глюкометр с управлением голосом,
  4. глюкометр Романовского, который просто подносится к коже человека.

Как провести тест?

Чтобы аппарат выдавал стабильный, точный результат следует:

  • Хранить аппарат в хороших условиях, без сильных перепадов температур и высокой влажности.
  • Полоски для теста должны сохраняться в защитном контейнере.

Перед проведением теста нужно:

  • Тщательно вымыть руки, а место прокола продезинфицировать спиртовой салфеткой.
  • После прокола кожу нужно обработать антисептиком.
  • Проводить забор крови для теста лучше в ванной комнате.
  • Игла должна быть простерилизована.
  • Глубину и место прокола должен определить лечащий врач.

Кровь на полоске должна аккуратно прислоняться к глюкометру, внимательно следовать инструкции в зависимости от типа аппарата.
Проводить забор крови нужно не более 4 раз в сутки.

Нормы анализа

Нормальными показателями для людей от 14 до 60 лет есть от 3 до 5 ммоль/л.

  • Для новорожденных до 1 месяца – от 2,8 — до 4 ммоль/л.
  • Детям до 14 лет – 3,5-5,5.
  • От 14 до 60 – 3-5,5.
  • От 60 до 90лет — 4,5 – 6,5 ммоль/л.
  • Старше 90 лет – до 6,7 ммоль/л.

Для женщин и мужчин показатель одинаковый.

У женщин он может повышаться только в гестационном периоде. У беременных норма 5- 6,5 ммоль/л.
Повышенные значения:

  • сахарный диабет;
  • дефицит железа;
  • повышение может быть из-за фетального гемоглобина.

Сниженные значения:

  • анемия;
  • кровотечения;
  • гипогликемия;
  • дальнейшее переливание крови.

Профилактические меры

При незначительных изменениях нормы глюкозы нужно как можно раньше наладить режим питания. Для больных гипергликемией нужно исключить использование углеводов.
Для тех, кто страдает диабетом, и хочет держать уровень глюкозы в норме, нужно использовать диету№9.

Если уровень глюкозы превышен из-за других возможных заболеваний, их нужно немедленно устранять.
В каждом отдельном случае нужно всегда консультироваться с врачом и следовать рекомендациям.

Если возникла необходимость в частом измерении уровня глюкозы, нужно очень тщательно подходить к тому, как правильно выбрать измеритель крови.

Практически все аппараты имеют сертификаты качества, а результаты точные как в лаборатории. Придерживаясь инструкций врача и фармацевта, можно следить за уровнем глюкозы в домашних условиях, без ежедневного посещения больницы. Держать уровень сахара в норме очень важно, ведь увеличение или снижение может влиять на работу всего организма и провоцировать различные заболевания. Кроме этого, людям которые болеют сахарным диабетом, нужно чаще посещать врача для обследования.

Определение концентрации глюкозы

Более 90% всех растворимых низкомолекулярных углеводов крови приходится на глюкозу, кроме того, в небольших количествах могут присутствовать фруктоза и пентозы, а при патологии и галактоза.

Глюкоза распределена почти равномерно между плазмой и эритроцитами, поэтому может определяться в цельной крови, плазме и сыворотке крови. Нормальное содержание в крови составляет 3,3-5,5 мМ/л. В физиологических условиях в крови может повышаться после обильной углеводной пищи, физиологических нагрузок, сильных эмоций.

Гипергликемия наблюдается при многих патологических состояниях: сахарном диабете, панкреатите, травмах и сотрясениях головного мозга, энцефалите, муковисциидозе, психическом возбуждении, отравлениях окисью углерода, ртутью. В зависимости от тяжести сахарного диабета уровень глюкозы натощак составляет : при легкой степени – 6,7-7,8 мМ/л.

Гипогликемия бывает при передозировке инсулина, заболеваниях поджелудочной железы, злокачественных заболеваниях, некоторых инфекционных и токсических поражениях печени, гипотириозе, наследственных заболеваниях, связанных с дефицитом ферментов.

Глюкозурия отмечается при сахарном диабете, гиперплазии коры надпочечников, нарушениях функции почек, сепсисе, травмах и опухолях головного мозга,отравлениях морфином, панкреатите, синдроме Фанкони.

Однократная нагрузка глюкозой вызывает у больных сахарным диабетом медленное нарастание гликемической кривой, при этом гипогликемическая фаза обычно не выявляется, понижение кривой очень медленное. В моче также определяется сахар.

В соременной диагностике сахарного диабета критерием является повышение содержания глюкозы в крови натощак до 7, 0 мМ/л, проводят пробу на выявление нарушения толерантности к глюкозе. Пробу проводят с сахарной нагрузкой, исследуют содержание глюкозы в крови натощак после приема внутрь 75 г глюкозы, растворенной в 200-300 мл воды. Кровь из пальца для определения содержания глюкозы берут каждые 30 минут в течение 2 часов. Проводится также тест на определение гликозилированного гемоглобина. В крови глюкоза связывается с молекулой гемоглобина (НвАIс) внутри эритроцитов. Число, связанных частиц глюкозы с молекулой гемоглобина напрямую связано с концентрацией глюкозы в крови, так как эритроциты живут 90 дней. По анализу гликозилированного гемоглобина можно установить концентрацию глюкозы за 3 месяца. Повышение уровня с определенного уровня на 5% говорит о хорошо скомпенсированном сахарном диабете, на 10% – частично компенсированный диабет, на 12% и более – некомпенсированный сахарный диабет.

Важно также для диагностики сахарного диабета определение концентрации инсулина и С-пептида. В молекуле преинсулина есть С-пептид, состоящий из 31 аминокислоты, соединяющий А и В цепи. При синтезе инсулина он вырезается пептидазами и вместе с инсулином он попадает в кровоток. До отщепления пептида инсулин не активен. Это позволяет поджелудочной железе образовывать запасы инсулина. С-пептид и инсулин выделяется в равных количествах, поэтому по С-пептиду можно оценить секрецию инсулина. Но надо знать, что скорость выведения из кровотока этих веществ разная. С-пептид дольше находится в крови, чем инсулин и он стабильнее инсулина в 5 раз. У здоровых С-пептид находится в пределах 1-4 нг/мл, инсулин от 6 до 27 мЕ/ мл. Повышение уровня С-пептида может свидетельствовать о гипертрофии В-клеток, об инсулин независимом сахарном диабете (ИНСД). Понижение С-пептида отмечается при инсулинзависимом сахарном диабете (ИЗСД).

В диагностике сахарного диабета применят определение концентрации альбумина в моче. В суточной моче у здоровых людей может обнаруживаться до 8 мг белка. При сахарном диабете белок повышается до 20-300 мг/л.

Дополнительным критерием на риск возникновения сахарного диабета является определение липидного обмена. Уровень триглицеридов в крови изменяется параллельно повышению содержания сахара в крови.

Методы определения глюкозы разделяют на три группы:

· методы с использованием цветных реакций, в которых участвуют продукты, образующиеся при нагревании углеводов с концентрированными кислотами.

Ферментативные методы исследования сочетают в себе высокую точность, они основываются на одной из двух реакций – гексокиназной или глюкоооксидазной. При гексокиназной глюкоза сначала фосфорилируется за счет АТФ благодаря действию гексокиназы; образовавшийся глюкозо-6-фосфатный эфир в присутствии глюкозо- 6- фосфат-дегидрогеназы восстанавливает NADP, количество которого определяется по увеличению светопоглощения в ультрафиолетовой области.

Легче выполнимы глюкозооксидазные методы, в которых глюкозоксидаза окисляет глюкозу кислородом воздуха с образованием перекиси водорода, количество которой определяется или химическим путем, или по ее способности в присутствии пероксидазы окислять диамины с образованием окрашенных продуктов.

Принцип метода: Глюкозооксидаза окисляет глюкозу с образованием перекиси водорода, которая под действием пероксидазы окисляет ортотолидин с образованием синего хромогена.

Реактивы:

1.Натрия хлорид 9 г/л (0,9г NaСI в 100 мл воды).

2. Сульфат цинка, 50 г/л: 5г сульфата цинка растворяют в воде, объем доводят до 100 мл.

3. Натр едкий, 0,3 моль/л: готовят, растворяя 1,2 NaOH в 100 мл воды.

4. Ортотолиидин, 1% раствор: 1г препарата растворяют в 100 мл абсолютного спирта.

5. Ацетатный буферный раствор рН 4,8: смешивают 4 части 0,25 Н уксусной кислоты и 6 частей 0,25 Н ацетата натрия.

7. Пероксидаза хрена.

8. Рабочий реактив в 80 мл ацетатного буфера растворяют 2 мг глюкозооксидазы и 1 мг пероксидазы, прибавляют 1 мл 1%-ного раствора ортотолидина, перемешивают и доводят объем буферным раствором до 100 мл.

9. Калибровочные растворы глюкозы. Сначала готовят основной раствор с концентрацией 50 ммоль/л, для чего 180 мг глюкозы растворяют в 20 мл бензойной кислоты. Из этого раствора готовят рабочие калибровочные растворы, содержащие: 3 ммоль/л; 6 ммоль/л; 9 ммоль/л; 12 ммоль/л; 15 ммоль/л; 18 ммоль/л; 21 ммоль/л, для чего берут 0,6 мл; 1,2 мл; 1,8 мл; 2,4 мл; 3,6 мл; 4,2 мл основного раствора и доводят насыщенным раствором бензойной кислоты до 10 мл. Эти растворы содержат глюкозу в тех же концентрациях, в которых она бывает в крови.

Ход определения: В центрифужные пробирки вносят 1,1 мл хлорида натрия, 0,4 мл раствора сульфата цинка и 0,4 мл 0,3 Н раствора NaOH, перемешивают; при этом образуется очень тонкий гель гидрата окиси цинка, в него выпускают 0,1 мл крови или калибровочного раствора, снава перемешивают и через 10 мин. центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин.

К 1 мл надосадочной жидкости добавляют 3 мл рабочего реактива и осторожно перемешивают. Через 15 минут развивается окраска и фотометрируют в кюветах с длиной оптического пути 1 см с красным светофильтром (625 нм) против холостого опыта, который ставят одновременно с рабочими пробами, но вместо крови берут физиологический раствор хлорида натрия. При приготовлении калибровочного графика вместо проб крови берут 0,1 мл соответствующего калибровочного раствора.

Нормальные величины натощак: 3,5- 5,7 ммоль/л (60-100 мг в 100 мл).

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Ссылка на основную публикацию
Для любых предложений по сайту: [email protected]