Ингибиторы протеаз обладают следующими свойствами

Ингибиторы протеолиза: механизм действия, препараты

Процесс переваривания пищи представляет собой сложную систему, состоящую из множества химических реакций. При любом нарушении данного процесса возникают сбои, которые могут привести к различным расстройствам в работе желудочно-кишечного тракта. Так, при недостатке или избытке некоторых ферментов могут возникать существенные нарушения функционирования пищеварительной системы.

Например, существует класс ферментов под названием протеазы. Их основная функция заключается в расщеплении белков и пептидов. К данному классу относятся такие вещества, как:

Все они выполняют очень важные функции для человеческого организма, однако при их чрезмерной активности развивается ряд опасных заболеваний.

Например, острый панкреатит. При данной патологии под действием этих ферментов начинается переваривание тканей поджелудочной железы собственным секретом. Все это приводит к развитию отечности и кровоизлияний в органе.

К счастью, существует такой класс препаратов, как ингибиторы протеолиза. О них и пойдет речь ниже.

Механизм действия

Ингибиторы протеолиза обладают способностью подавлять активность протеаз, в результате чего последние прекращают разрушение и переваривание клеток поджелудочной железы. Происходит это за счет того, что препарат способен образовать совместно с ферментами белковые пространственные структуры, которые затем распадаются вместе с протеазами.

Таким образом, при применении данных средств происходит следующее:

• Быстрое купирование острой боли в области пораженного органа.
• Устранение симптомов интоксикации.
• Торможение процесса развития отека и некроза тканей железы.

Препараты

Список препаратов, способных подавлять функцию ферментов, достаточно обширный, однако к ингибиторам протеолиза относятся такие средства, как “Контрикал”, “Трасилол”, “Пантрипин”, “Гордокс”.

“Контрикал”

Лекарственное средство, производством которого занимается хорватская фармацевтическая компания “Плива Хрватска д.о.о”.

Помимо ингибитора протеолиза, препарат может применяться еще и как сильное гемостатическое средство, потому что он способен останавливать процесс разжижения крови.

Сырьем для производства “Контрикала” служит легочная ткань крупного рогатого скота.

Под действием препарата тормозится выработка не только трипсина, но и плазмина, и калликреина.

Лекарственное средство имеет одну единственную форму выпуска – порошок для приготовления инъекционного раствора, который следует вводить внутривенно.

Стоимость препарата составляет примерно 1500-2000 за 10 флаконов.

“Трасилол”

Является еще одним представителем группы ингибиторов протеолиза.

Действующее вещество аналогично таковому у “Контрикала” и называется апротинином. Несмотря на одинаковый состав, эти два препарата получают из разного сырья. В случае с “Трасилолом” субстанцией служат околоушные слюнные железы крупного рогатого скота.

В целом, препараты являются аналогами. Но, согласно исследованиям, “Контрикал” имеет более выраженный терапевтический эффект. Поэтому он снимает даже самую сильную боль, и его применение предпочтительно при купировании тяжелых состояний.

Выпускается во флаконах с раствором для инфузий.

Стоимость препарата “Трасилол” составляет около 2000 рублей за флакон.

“Пантрипин”

Еще один препарат – ингибитор протеолиза, который также содержит в себе апротинин.

Производится препарат из поджелудочной железы крупного рогатого скота , что делает его максимально близким с человеческими клетками.

“Пантрипин” часто является препаратом выбора для лечения острого панкреатита.

Форма выпуска и стоимость аналогична “Трасилолу”.

“Гордокс”

“Гордокс”, как и предыдущее средство на основе апротинина, вырабатывается из поджелудочной железы крупных животных.

Выпускается в виде ампул с инъекционным раствором.

Лекарство не уступает остальным препаратам по силе лечебного эффекта, но стоит несколько ниже.

Однако упаковка данного средства, содержащая в себе 25 ампул по 10 мл, обойдется покупателю в 4500-5000 рублей.

Особые указания

Стоит отметить, что недопустимо злоупотреблять применением ни одним из этих препаратов, так как это может привести к развитию привыкания клеток поджелудочной железы к действующему веществу (апротинину) и значительному снижению эффективности перечисленных выше средств.

Заключение

Благодаря появлению ингибиторов протеолиза удалось значительно снизить количество смертей от острого панкреатита.

Данные препараты обладают высоким терапевтическим эффектом и способны купировать даже сильные болевые синдромы. Особенно актуально применение ингибиторов протеолиза при панкреатите в острой стадии.

Еще одним достоинством препаратов является небольшое количество побочных эффектов.

Основной недостаток перечисленных выше средств – дороговизна лечения и невозможность постоянного приема. Поэтому применение ингибиторов протеолиза возможно только при острой необходимости.

Применение ингибиторов протеаз для лечения поджелудочной железы

При панкреатите активизация протеаз приводит к возникновению воспаления органа и развитию некротических участков.

Чтобы предупредить такие патологические процессы, специалист прописывает Контрикал, Трасилол, Гордокс или Антагозан. Использование этих лекарств для внутривенного введения актуально в первый день острого панкреатита.

Виды ферментов поджелудочной железы

Основная задача поджелудочной железы – это выполнение эндокринной (внутренней) и экзокринной (внешней) функции. Эндокринная функция состоит в продуцировании гормонов – инсулина, снижающего уровень глюкозы, и глюкагона, способствующего отложению глюкозы в печени.

Внешнесекреторная функция поджелудочной железы заключается в производстве специальных ферментов (энзимов), предназначенных для переваривания пищи. Их следует поделить на несколько групп – липолитические, амилолитические и протеолитические ферменты. Рассмотрим подробнее каждую составляющую.

Липолитические ферменты. Данная группа отвечает за расщепление жиров до кислот жирного типа и глицерола. Пролипаза – неактивный фермент липаза, которая при поступлении в двенадцатиперстную кишку объединяется с колипазой.

Активизация липазы происходит при достаточной величине солей желчных кислот и трипсина. Распад липолитических компонентов выполняется за 7-14 часов. За их фильтрацию отвечают почечные клубочки: они способствуют всасыванию липазы в тканевой структуре, поэтому частицы липолитических компонентов не обнаруживают в урине. Вещества, аналогичные липазе, продуцируются также печенью, легкими и кишечником.

Амилолитические ферменты. Существует несколько разновидностей – альфа-, бета- и гамма-амилаза. Данную группу ферментов называют также крахмалом. В процессе пищеварения задействована только альфа-амилаза.

Ее в небольшом количестве производят также слюнные железы, особенно при пережевывании пищи. Так, мы ощущаем сладкий привкус во время пережевывания крахмалсодержащей еды – риса или пюре. Благодаря амилазе процесс усвоения крахмала и прочих сложных углеводов становится незатруднительным.

Протеолитические ферменты. Главная задача данной группы – это расщепление белков. Протеолитические ферменты способствуют распаду связующих аминокислот, содержащихся в пептидах и протеинах. В панкреатическом соке существует два разных вида протеазы:

1. Пептидаза, или экзопептидаза, отвечающая за гидролиз внешних соединений пептидов.
2. Протеиназа, или эндопептидаза, которая расщепляет внутренние соединения пептидов.

Таким образом, липаза, амилаза и протеаза составляют панкреатический сок, который при попадании в двенадцатиперстную кишку расщепляет сложные молекулы пищи на более простые соединения.

Причины и симптомы панкреатита

В организме здорового человека активизация панкреатических ферментов происходит в двенадцатиперстной кишке.

Если функционирование амилазы, протеазы и липазы начинается в самой поджелудочной железе, можно говорить о сбое работы органа.

Под панкреатитом понимают комплекс синдромов и болезней, сопровождающихся активизацией ферментов в железе, что приводит к процессу «самопереваривания». В итоге они не поступают в двенадцатиперстную кишку, и нарушается пищеварение.

Выделяют ряд причин, которые приводят к такому патологическому процессу:

• частый прием спиртных напитков;
• несоблюдение сбалансированного питания;
• чрезмерное потребление жареной и жирной еды;
• употребление чересчур сытной пищи после строгой диеты или голодания;
• бесконтрольный прием некоторых медикаментозных препаратов;
• травмы органов пищеварительной системы;
• патологии инфекционного характера.

При активизации ферментов в поджелудочной железе происходит ее воспаление: она увеличивается в размере, и появляются некротические участки. Такой процесс не может протекать бессимптомно, к тому же происходит нарушение работы желудочно-кишечного тракта.

При дефиците панкреатических ферментов в двенадцатиперстной кишке и воспалении поджелудочной железы наблюдаются такие симптомы:

1. Болевые ощущения в левом подреберье, часто опоясывающего характера.
2. Значительное снижение трудоспособности, общее недомогание и слабость.
3. Диспепсическое расстройство – вздутие живота, тошнота или рвота, отсутствие аппетита, нарушение стула.

Признаки заболевания могут быть различными зависимо от недостатка того или иного фермента:

• Дефицит амилазы приводит к диарее, авитаминозу, резкому похудению. Кал становится жидким, в нем присутствуют непереваренные частицы пищи.
• Недостаточное количество липазы, расщепляющей жиры, вызывает стеаторею – рост количества жиров в стуле. При панкреатите испражнения становятся желтоватыми или оранжевыми, в них наблюдается примесь слизи.
• При дефиците протеазы в каловых массах обнаруживаются непереваренные протеиновые волокна. Характерным симптомом является развитие анемии.

Если человек замечает такие признаки, ему необходимо как можно быстрее обратиться за медицинской помощью. Врач назначит прохождение анализов и адекватную терапию.

Естественные ингибиторы панкреатических ферментов

В организме производятся не только ферментативные вещества, способствующие расщеплению сложных молекул, но и ингибиторы секреции поджелудочной железы, т.е. компоненты, препятствующие чрезмерной выработке панкреатического сока.

К блокаторам ферментов следует отнести панкреатический полипептид (ППП), YY-пептид, соматостатин, панкреатический глюкагон, панкреастатин и нейропептиды.

Островки Лангерганса, преимущественно расположенные в хвостовой части поджелудочной железы, вырабатывают специальный гормон, ППП, который ингибирует панкреатическое производство воды, ферментов и бикарбонатов. Он также препятствует выработке ацетилхолина.

Секреция ППП увеличивается в таких случаях:

1. при мнимом кормлении или потреблении еды;
2. после стимулирования блуждающего нерва;
3. при ацидификации двенадцатиперстной кишки;
4. при воздействии гастрина и гастрин-рилизиг пептида;
5. при воздействии секретина, холецистокинина и ВИП.

Дистальный участок подвздошной кишки и толстая кишка высвобождает пептид YY, как только в пищеварительный тракт попадают жиры. Данный пептид способствует уменьшению восприимчивости железы к влиянию холецистокинина и секретина.

Д-клетки поджелудочной железы и слизистая оболочка пищеварительного тракта производят соматостатин. Этот гормон препятствует выработке ферментов и бикарбонатов. В продуцировании соматостатина принимает участие автономная нервная система, как только с пищей поступают жиры и аминокислоты.

Прочие ингибиторы поджелудочной железы представлены такими гормонами:

• Панкреатический глюкагон, приостанавливающий производство жидкости, бикарбонатов и ферментов.
• Панкреастатин, тормозящий освобождение ацетилхолина. Он производится в эфферентных окончаниях блуждающего нерва.
• Нейропептиды, которые состоят из кальцитонин-информационного пептида (стимулирует соматостатин) и энкефалинов (снижают выработку ацетилхолина).

При деструктивных процессах в железе может нарушиться секреция ингибиторов панкреатических ферментов, поэтому приходится принимать медикаментозные средства.

Принципы лечения при панкреатите

Две главные составляющие действенной терапии заболевания – это диета и прием медикаментозных препаратов. Схема лечения разрабатывается индивидуально в зависимости от степени тяжести болезни и поражения поджелудочной железы.

Специальное питание при панкреатите основано на диете №5 по Певзнеру. Оно исключает чрезмерное потребление углеводсодержащих и жирных продуктов, а также направлено на прием белковой пищи.

При наступлении хронического панкреатита назначается 3-4 дневное лечебное голодание. В течение этого времени необходимо полностью отказаться от приема пищи и пить теплые щелочные воды, например, Боржоми.

После голодания при панкреатите в рацион вводятся щадящие продукты, которые не будут отягощать пищеварительную систему. Больным панкреатитом разрешается употреблять:

• диетические сорта мяса и рыбы;
• овощные супы и ненаваристые бульоны;
• вчерашний хлеб и галеты;
• обезжиренные молочные продукты;
• свежие фрукты, зелень и овощи;
• крупы, сваренные на воде или нежирном молоке;
• яйца в ограниченном количестве;
• шиповниковый отвар, мед или варенье (ограниченно).

При воспалении поджелудочной железы необходимо отказаться от пищи, отягощающей процесс пищеварения:

1. Шоколадные изделия, сдоба, печенье.
2. Свежий хлеб.
3. Жареные продукты.
4. Консервация, копчености и соленья.
5. Жирные сорта мяса и рыбы.
6. Жирные молочные изделия.
7. Газированные напитки.
8. Специи и пряности.
9. Наваристые бульоны.
10. Яйца в большом количестве.
11. Крепкий чай и кофе.
12. Колбасные изделия.
13. Бобовые и томаты.

При обострении хронического панкреатита необходимо придерживаться постельного режима.

Медикаментозное лечение поджелудочной железы включает использование:

• ингибиторов ферментов для сокращения активизации протеаз (протеиназ) поджелудочной железы;
• антибактериальных средств во избежание воспалительных процессов брюшной полости, гнойных воспалений сальниковой сумки, развития панкреонекроза и гниения флегмоны клетчатки пространства за брюшиной;
• Н2-блокаторов для снижения выработки соляной кислоты;
• антацидных препаратов для нейтрализации соляной кислоты в кишечнике;
• спазмолитиков при судорогах гладкой мускулатуры, связанной с нарушением функции сфинктера в панкреатическом протоке;
• холинолитических препаратов для блокировки аномальных процессов в ганглиях и коре головного мозга;

Помимо этого применяются ферментативные средства для улучшения процесса пищеварения и устранения диспепсического расстройства.

Эффективные медикаментозные препараты

В первый день обострения хронической формы актуально применение ингибиторов протеаз для лечения панкреатита. Данные препараты устраняют причину появления воспалительных очагов и распространение некротических участков.

Медикаментозные препараты добывают из легочной паренхимы и поджелудочной железы крупного скота.

Ниже представлены наиболее эффективные лекарства, дозировка которых определяется лечащим врачом индивидуально. Они выпускаются не в форме таблеток, а в форме концентрата или лиофилизата для инфузий.

Название препарата	Действующие вещества	Средняя дозировка	Противопоказания
Контрикал	Aprotinin, Протеолиза ингибитор	При острой форме заболевания – от 20000 до 30000 ЕД препарата внутривенно.	Гиперчувствительность к действующим веществам и белкам крупного скота, ДВС-синдром, беременность, лактационный период, применение средства на протяжении последних12 месяцев.
Трасилол	Aprotinin	Средняя доза – 50000 ЕД внутривенно.	Повышенная чувствительность к компонентам, аллергические реакции, ДВС-синдром, вынашивание ребенка и грудное вскармливание.
Гордокс	Aprotinin, Протеолиза ингибитор	Начальная дозировка составляет при остром панкреатите 50000-1000000 КИЕ.	Гиперчувствительность к действующим веществам, сидром ДВС.
Антагозан	Aprotinin, Протеолиза ингибитор	Начальная дозировка составляет при остром панкреатите 50000-1000000 КИЕ.	Повышенная чувствительность к компонентам средства, аллергия на белок крупного скота, беременность, грудное вскармливание, ДВС-синдром.

Лечение панкреатита ингибиторами при внутривенном введении проводится только в лежачем положении. Причем медицинская сестра и доктор должны внимательно следить за состоянием больного. Также должна строго соблюдаться диета №5, которая в комплексе с медикаментозной терапией обеспечит успешное выздоровление пациента без каких-либо осложнений.

Как лечить панкреатит расскажут эксперты в видео в этой статье.

Ингибиторы протеазы

Ингибиторы протеазы, проникая в инфицированные вирусом клетки, блокируют активность вирусного фермента протеазы, препятствуют распаду длинных цепей протеинов и энзимов на короткие звенья, необходимые ВИЧ для образования новых копий. Без них вирус дефектен и не’ может инфицировать клетку. Ингибиторы протеазы более мощно тормозят репликацию вируса, чем ингибиторы обратной транскриптазы и за 1 мес лечения снижают вирусную нагрузку на 99%, в силу чего наступает ремиссия болезни, повышается уровень CD4+ лимфоцитов. Действие ингибиторов протеазы осуществляется в лимфоидных клетках человека Поскольку протеаза ВИЧ отличается от протеазы человека, ингибиторы вирусной протеазы действуют избирательно, не блокируя функцию фермента клеток человека. Но к этим препаратам и быстрее формируются устойчивые клоны вирусов.

Среди ингибиторов протеазы наиболее широкое распространение получили криксиван и инвираза в связи с низкой связываемостью с белками плазмы, а следовательно возможностью в активной форме в больших концентрациях накопиться в плазме, а также способностью проникать через гематоэнцефалический барьер. Криксиван (индинавира сульфат) обладает активностью против ВИЧ-1. Обычно назначается по 800 мг (2 капсулы по 400 мг) внутрь каж-дые 8 ч, причем дозировка одинакова как при монотерапии, так и при сочетании с другими антиретровирусными лекарственными средствами. Рекомендуется назначать крик-сиван в следующих ситуациях:

– больным, ранее не получавшим антиретровирусной терапии:

а) в сочетании с аналогами нуклеозидов,

б) или в виде монотерапии для начального лечения (если включение аналогов нуклеозидов клинически не оправдано),

— больным, ранее лечившимся антиретровирусными средствами:

а) в сочетании с аналогами нуклеозидов,

б) в качестве монотерапии для лиц, получавших или получающих аналоги нуклеозидов.

В лечении ВИЧ-инфекции произошел коренной перелом, связанный с применением ингибиторов протеаз. Хотя замедлять прогрессирование ВИЧ-инфекции до клинических проявлений СПИДа могут и ингибиторы обратной транскриптазы, эффективность ингибиторов протеаз оказалась намного выше. Отчасти это объясняется различными механизмами действия препаратов этих 2 классов. Ингибиторы обратной транскриптазы подавляют активность ферментов вируса, что способствует транскрипции вирусной РНК на комплементарной цепочке ДНК, которая затем встраивается в геном человека. Дальше комплементарная цепочка ДНК транслируется на мессенджере РНК, кодирующем белки ВИЧ, которые впоследствии встраиваются в зрелые вирусы. Эффективность ингибиторов обратной транскриптазы ограничивается во-первых, когда встраивание комплементарной цепочки ДНК уже произошло, то ингибиторы обратной транскриптазы не влияют на продукцию вирусного белка. Во-вторых, обратная транскриптаза ВИЧ не всегда точно транслируется с мессенджера РНК, для нее характерен высокий уровень мутаций. Если учесть, что количество продуцируемых за сутки вирусов превышает 10°, все это в совокупности способствует быстрому формированию устойчивости к ингибиторам обратной транскриптазы.

В отличие от ингибиторов обратной транскриптазы ингибиторы протеаз действуют на этапе репликации вируса, подавляя активность кодируемой вирусом аспартатпротеазы, которая расщепляет крупные белки-предшественники на мелкие пептиды, необходимые для встраивания в вирус. Они предотвращают репликацию вируса после интеграции комплементарной цепочки ДНК в геном клетки и в отличие от ингибиторов обратной транскриптазы могут препятствовать размножению вируса в инфицированной клетке.

Проникая в инфицированные вирусом клетки, ингибиторы протеазы блокируют активность вирусного фермента протеазы, препятствуют распаду длинных цепей протеинов и энзимов на короткие звенья, необходимые ВИЧ для образования новых копий. Без них вирус дефектен и не может инфицировать клетку. Ингибиторы протеазы более мощно тормозят репликацию вируса, чем ингибиторы обратной транскриптазы и за 1 мес лечения снижают вирусную нагрузку на 99%, в силу чего наступает ремиссия болезни, повышается уровень CD4-лимфоцитов. Действие ингибиторов протеазы осуществляется в лимфоидных клетках человека. Поскольку протеаза ВИЧ отличается от протеазы человека, ингибиторы вирусной протеазы действуют избирательно, не блокируя функцию фермента клеток человека. Но к этим препаратам и быстрее формируются устойчивые клоны вирусов, особенно при использовании ингибиторов протеаз в виде монотерапии.

Токсичность ингибиторов протеазы довольно выражена, у больных через 1-2 года терапии развивается липодистрофия и растет холестерин крови. Отрицательные метаболические эффекты ингибиторов протеазы значительно снижают эффект терапии.

R. М. Gulick et al. (1997) показали, что добавление ингибитора протеаз к двум ингибиторам обратной транскриптазы в значительной степени повышает способность препаратов снижать содержание ВИЧ в крови. Ни у одного больного, принимавшего два ингибитора обратной транскриптазы, содержание вируса не уменьшалось ниже уровня, поддающегося определению, тогда как на фоне трех-компонентного лечения ингибитором протеаз и двумя ингибиторами обратной транскриптазы такой эффект наблюдался в 90% случаев.

Info-Farm.RU

Фармацевтика, медицина, биология

Ингибиторы протеазы

Ингибиторы протеазы — это группа антиретровирусных препаратов, механизм действия которых заключается в блокировании фермента вируса ВИЧ — протеазы, который необходим для расщепления полипротеинових предшественников вируса на отдельные белки, входящие в состав вируса и нарушают образование белков вирусного капсида. Препараты группы активны против вируса ВИЧ как I, так и II типа. Некоторые препараты группы активны против вируса гепатита С. К ингибиторов протеазы относятся саквинавир, лопинавир, ритонавир, индинавир, нелфинавир, ампренавир, фосампренавир, атазанавир, дарунавир, типранавир, активные против вируса ВИЧ; и боцепревир и телапревир, активные против вируса гепатита С. Первым препаратом группы, примененным в клинической практике, был саквинавир в 1995 году, что фактически стало началом эры ВААРТ.

Механизм действия

Ингибиторы протеазы после перорального приема проникают в пораженные клетки и ингибируют активный центр фермента вируса ВИЧ протеазы, нарушают образование вирусного капсида и подавляют репликацию вируса ВИЧ с образованием незрелых вирусных частиц, которые не могут инфицировать клетки организма. К ингибиторов протеазы чувствительны вирусы ВИЧ-1, ВИЧ-2 и вирус гепатита С и нечувствительны протеазы человека и других эукариот. Препараты группы могут эффективно подавлять вирус ВИЧ, в том числе при неэффективности ингибиторов обратной транскриптазы.

Фармакокинетика

Большинство ингибиторов протеазы хорошо, но медленно всасываются в желудке, прием препаратов с пищей улучшает всасывание. Максимальная концентрация ингибиторов протеазы в крови достигается в среднем в течение 4:00. Биодоступность препаратов группы колеблется, поэтому часто ингибиторы протеазы применяются с другим препаратом группы — ритонавиром, имеющий высокую степень сходства с некоторыми формами цитохрома P-450 и выполняет роль фармакокинетического усилителя (бустера) для других ингибиторов протеазы. Большинство препаратов группы плохо проникают через гематоэнцефалический барьер. Большинство ингибиторов протеазы проникают через плацентарный барьер и выделяются в грудное молоко. Метаболизируются ингибиторы протеазы в печени с образованием неактивных метаболитов. Выводятся из организма препараты группы преимущественно почками, частично выводятся с калом. Период полувыведения препаратов группы колеблется от 1:00 (саквинавир) до 10:00 (ампренавир), в большинстве препаратов группы это время не изменяется при печеночной и почечной недостаточности.

Применение

Ингибиторы протеазы применяются для лечения ВИЧ-инфекции, вызванной вирусом как I, так и II типа исключительно в составе комбинированной терапии. Боцепревир и телапревир применяются для лечения гепатита С. Препараты группы применяются беременными женщинами для профилактики вертикальной передачи вируса ВИЧ ребенку и используются для предотвращения профессионального заражения медицинскими работниками во время аварийных ситуаций.

Побочное действие

При применении ингибиторов протеазы среди побочных эффектов чаще наблюдаются поражения кожи — высыпания на коже, зуд кожи, аллергический дерматит, крапивница, фолликулит; с аллергических реакций часто наблюдаются синдром Стивенса-Джонсона, синдром Лайелла, анафилактический шок, кашель, лихорадка. Со стороны пищеварительной системы часто наблюдаются тошнота, рвота, диарея, снижение аппетита, боль в животе, гепатит, желтуха, печеночная недостаточность, панкреатит, желудочно-кишечные кровотечения, повышение уровня активности аминотрансфераз и ГГТП в крови, повышение уровня билирубина в крови. Со стороны нервной системы могут наблюдаться головная боль, бессонница, сонливость, повышенная утомляемость, гиперкинезы, парестезии, потери сознания, судороги. Со стороны сердечно-сосудистой системы могут наблюдаться аритмии, иногда — стенокардия, инфаркт миокарда, артериальная гипо- и гипертензия, спазмы периферических сосудов. Со стороны опорно-двигательного аппарата могут наблюдаться миалгии, миопатии, артралгии, рабдомиолиз. Со стороны мочевыделительной системы наблюдаются острая и хроническая почечная недостаточность, дизурия, иногда нефролитиаз. Среди других побочных эффектов наблюдаются липодистрофия, лактатацидоз, сахарный диабет, гинекомастия (преимущественно в комбинации с другими препаратами), повышение риска кровотечений у больных гемофилией. При проведении комбинированной антиретровирусной терапии с применением ингибиторов протеазы у больных возрастает вероятность лактатацидоза и гепатонекроза. При проведении ВААРТ у больных возрастает вероятность развития сердечно-сосудистых осложнений, гипергликемии и гиперлактемии. При проведении ВААРТ возрастает вероятность синдрома восстановления иммунной системы с обострением латентных инфекций.

Противопоказания

Абсолютным противопоказанием для применения препаратов группы ингибиторов протеаз является гиперчувствительность к препарату. Препараты группы с осторожностью применяются при печеночной недостаточности, некоторые препараты с осторожностью применяются при беременности. Препараты группы не применяются во время кормления грудью. Препараты группы не рекомендуется применять вместе с астемизолом, цизапридом, терфенадином, мидазоламом, пимозидом, бепридилом, амиодароном, алкалоидами спорыньи, пропафеноном.

Ингибиторы протеаз обладают следующими свойствами

Есть вот такая методика из статьи открытого доступа (http://highwire.stanford.edu/cgi/searchresults?fulltext=Alex+Odermatt%2C+Kazimierz+Kurzydlowski&andorexactfulltext=and&titleabstract=&andorexacttitleabs=and&title=&andorexacttitle=and&author1=&pubdate_year=&volume=&firstpage=&fmonth=Jan&fyear=1753&tmonth=Dec&tyear=2013&fdatedef=1+January+1753&tdatedef=5+Dec+2012&src=hw&searchsubmit=redo&resourcetype=1&x=28&y=8:)

Cardiac microsomes were prepared from rabbit heart ventricles using
a protocol similar to that of Tada et al. (1988). Ventricles were
trimmed of fat and connective tissue and homogenized in a small
Waring blender in a buffer containing 10 mM imidazole, pH 7.0, 0.3 M
sucrose, 0.5 mM dithiothreitol (DTT), and the following protease inhibitors:
0.5 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 0.5 mg/ml leupeptin, 0.5
mg/ml aprotinin, 0.5 mg/ml pepstatin, and 1 mM benzamidine. Homogenization
was carried out in three bursts for 15 s, followed by 10 strokes
in a Teflon homogenizer. The homogenates were centrifuged for 10 min
at 4000 g, and the supernatant was filtered through cheesecloth and
centrifuged for an additional 10 min at 27,000 g. Microsomal membranes
were then sedimented by centrifugation of the supernatant for
1 h at 120,000 g. The pellet was resuspended in a solution containing
0.6 M KCl, 0.3 M sucrose, 20 mM Tris maleate, pH 7.0, 0.5 mM DTT, and
protease inhibitors, and the microsomes were sedimented for 1 h at
120,000 g, leaving contaminating contractile proteins in the supernatant.
The resulting pellet was resuspended in storage buffer containing
0.15 M KCl, 0.25 M sucrose, 10 mM Tris maleate, pH 7.0, 0.5 mM
DTT, and protease inhibitors. Aliquots were quick-frozen and stored in
liquid nitrogen. Before use, microsomes were thawed on ice and washed
twice in storage buffer lacking DTT and protease inhibitors.

Можно ли в этой методике используемый набор ингибиторов протеаз заменить вот на это http://www.sigmaaldrich.com/catalog/produc. ng=en&region=BY (отдельно тех ингибиторов, которые приведены в методике у меня нет)?

&nbspp8340dat.pdf размер: 79.94к кол-во скачиваний: 421

Вы зря вообще так паритесь.

Эти антипротеазные коктейли – весьма условная вещь. А писатели статей слушают и применяют все, что им насоветуют производители. Получается прямо как в магазине бытовой техники.

Давайте разберемся: Если вам так хочется.

Статья:
PMSF
leupeptin
aprotinin
pepstatin
benzamidine – не совпадает

SIGMA
AEBSF – по ингибирующим свойствам полный аналог PMSF
Aprotinin – совпадает
Bestatin- не совпадает
Leupeptin – совпадает
Pepstatin – совпадает
E-64 – не совпадает

Кто же они эти буквы и цифры.
PMSF/AEBSF – необратимые ингибиторы сериновых протеаз
aprotonin – ингибитор трипсинободобных протеаз(трипсин и подобные ему протеазы – это СЕРИНОВЫЕ протаезы)
Leupeptin – ингибирует сериновые, цистеиновые, треониновые протеазы
pepstatin – ингибитор песина и др. аспаргиновых протеаз
benzamidine – еще один ингибитор трипсиноподобных протеаз
E-64 – ингибитор цистеиновых протеаз
Bestatin – специфичный ингибитор амнометаллоппептидаз.

И что же мы видим:
Если вы использовали PMSF, то вам уже не очень то и нужны апротонин и бензамидин.

Если вы добавили ЭДТА, то вам не нужен бестатитн.

А вот без пепстатина обойтись трудно.
Леупептин дублирует Е-64
и тд.

Кроме всего прочего химические ингибиторы разрушают реакционный центр фермента, часто необратимо. К таким относятся ЭДТА(этот обратимо), PMSF, NEM(N-этилмалеиимид, цистеиновые протеазы).
Ингибиторы же пептидной природы работают как конкуренты связываясь с реакционным центром и мешая связыванию белкового субстрата.

Оба коктейля на мой взгляд требуют добавления ЭДТА, как ингибитора металлопротеаз, если конечно это не мешает, каким то специфичным параметрам конкретного выделения.

оба коктейля избыточны. Из первого можно выкинуть апротонин и бензамидин. Из второго апротонин и Е-64.

Второй коктейль по активности перекрывает первый.

Ингибиторы протеаз обладают следующими свойствамиСсылка на основную публикациюwpDiscuz

guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость